நாவல் கொரோனவைரஸ் (SARS-COV-2) மல்டிபிளக்ஸ் ரியல்-டைம் பி.சி.ஆர் கிட்
இந்த மிகவும் உணர்திறன், பயன்படுத்த தயாராக உள்ள பி.சி.ஆர் கிட் நீண்ட கால சேமிப்பிற்காக லியோபிலிஸ் வடிவத்தில் (முடக்கம்-உலர்த்தும் செயல்முறை) கிடைக்கிறது. கிட் அறை வெப்பநிலையில் கொண்டு செல்லப்பட்டு சேமிக்கப்படலாம் மற்றும் ஒரு வருடம் நிலையானது. பிரீமிக்ஸின் ஒவ்வொரு குழாயிலும் பி.சி.ஆர் பெருக்கத்திற்குத் தேவையான அனைத்து உலைகள் உள்ளன, இதில் தலைகீழ்-டிரான்ஸ்கிரிப்டேஸ், தாக் பாலிமரேஸ், ப்ரைமர்கள், ஆய்வுகள் மற்றும் டி.என்.டி.பி.எஸ் அடி மூலக்கூறுகள் உள்ளன. இதற்கு 13ul வடிகட்டிய நீர் மற்றும் 5ul பிரித்தெடுக்கப்பட்ட ஆர்.என்.ஏ வார்ப்புருவை மட்டுமே சேர்க்க வேண்டும், பின்னர் அதை இயக்கலாம் மற்றும் பி.சி.ஆர் கருவிகளில் பெருக்க முடியும்.
QPCR இயந்திரம் பின்வரும் தேவைகளை பூர்த்தி செய்ய வேண்டும்:
1. பொருத்தம் 8 ஸ்ட்ரிப் பி.சி.ஆர் குழாய் தொகுதி 0.2 எம்.எல்
2. நான்கு கண்டறிதல் சேனல்களைக் கொண்டிருங்கள்:
சேனல் | கிளர்ச்சி (என்எம்) | உமிழ்வு (என்.எம்) | முன் அளவீடு செய்யப்பட்ட சாயங்கள் |
1. | 470 | 525 | FAM, SYBR GREEN I. |
2 | 523 | 564 | விக், ஹெக்ஸ், டெட், ஜோ |
3. | 571 | 621 | ரோக்ஸ், டெக்சாஸ்-ரெட் |
4 | 630 | 670 | Cy5 |
பி.சி.ஆர்-பிளாட்ஃபார்ம்ஸ்:
7500 ரீல்-டைம் பி.சி.ஆர் அமைப்பு, பயோராட் சி.எஃப் 96, ஐசைக்ளர் ஐ.க்யூ ™ நிகழ்நேர பி.சி.ஆர் கண்டறிதல் அமைப்பு, ஸ்ட்ராடஜீன் எம்.எக்ஸ் 3000 பி, எம்.எக்ஸ் 3005 பி
நாவல் கொரோனவைரஸ் நியூக்ளிக் அமில கண்டறிதல் மறுஉருவாக்கத்தின் குளிர் சங்கிலி போக்குவரத்தின் சிரமம்
வழக்கமான நியூக்ளிக் அமிலக் கண்டறிதல் உலைகள் நீண்ட தூரத்தில் கொண்டு செல்லப்படும்போது, (-20 ± 5) res உலைகளில் உள்ள நொதியின் பயோஆக்டிவ் செயலில் இருப்பதை உறுதிப்படுத்த குளிர் சங்கிலி சேமிப்பு மற்றும் போக்குவரத்து தேவைப்படுகிறது. வெப்பநிலை தரத்தை அடைகிறது என்பதை உறுதிப்படுத்த, நியூக்ளிக் அமில சோதனை மறுஉருவாக்கத்தின் ஒவ்வொரு பெட்டிக்கும் பல கிலோகிராம் உலர்ந்த பனி தேவைப்படுகிறது, ஆனால் இது இரண்டு அல்லது மூன்று நாட்களுக்கு மட்டுமே நீடிக்கும். தொழில் நடைமுறையின் முன்னோக்கில், உற்பத்தியாளர்களால் வழங்கப்பட்ட உலைகளின் உண்மையான எடை கொள்கலனின் 10% க்கும் குறைவாக (அல்லது இந்த மதிப்பை விட மிகக் குறைவு). பெரும்பாலான எடை உலர்ந்த பனி, பனி பொதிகள் மற்றும் நுரை பெட்டிகளிலிருந்து வருகிறது, எனவே போக்குவரத்து செலவு மிக அதிகமாக உள்ளது.
மார்ச் 2020 இல், கோவிட் -19 வெளிநாடுகளில் பெரிய அளவில் வெளியேறத் தொடங்கியது, மேலும் நாவல் கொரோனவைரஸ் நியூக்ளிக் அமிலக் கண்டறிதல் மறுஉருவாக்கத்திற்கான தேவை வியத்தகு அளவில் அதிகரித்தது. குளிர் சங்கிலியில் உலைகளை ஏற்றுமதி செய்வதற்கான அதிக செலவு இருந்தபோதிலும், பெரும்பாலான உற்பத்தியாளர்கள் அதிக அளவு மற்றும் அதிக லாபம் காரணமாக அதை ஏற்றுக்கொள்ள முடியும்.
எவ்வாறாயினும், தொங்கும் எதிர்ப்பு தயாரிப்புகளுக்கான தேசிய ஏற்றுமதி கொள்கைகளை மேம்படுத்துவதோடு, மக்கள் மற்றும் தளவாடங்களின் ஓட்டம் மீது தேசிய கட்டுப்பாட்டை மேம்படுத்துவதன் மூலம், உலைகளின் போக்குவரத்து நேரத்தில் நீட்டிப்பு மற்றும் நிச்சயமற்ற தன்மை உள்ளது, இதன் விளைவாக முக்கிய தயாரிப்பு சிக்கல்கள் ஏற்பட்டன போக்குவரத்து மூலம். நீட்டிக்கப்பட்ட போக்குவரத்து நேரம் (சுமார் அரை மாதத்தின் போக்குவரத்து நேரம் மிகவும் பொதுவானது) தயாரிப்பு வாடிக்கையாளரை அடையும் போது அடிக்கடி தயாரிப்பு தோல்விகளுக்கு வழிவகுக்கிறது. இது பெரும்பாலான நியூக்ளிக் அமில உலைகள் ஏற்றுமதி நிறுவனங்களை சிக்கலாக்கியுள்ளது.
பி.சி.
லியோபிலிஸ் செய்யப்பட்ட பி.சி.ஆர் உலைகளை அறை வெப்பநிலையில் கொண்டு செல்லலாம் மற்றும் சேமிக்க முடியும், இது போக்குவரத்து செலவைக் குறைப்பது மட்டுமல்லாமல், போக்குவரத்து செயல்முறையால் ஏற்படும் தர சிக்கல்களையும் தவிர்க்கலாம். எனவே, ஏற்றுமதி போக்குவரத்தின் சிக்கலைத் தீர்க்க மறுசீரமைப்பை லியோபிலிங் செய்வது சிறந்த வழியாகும்.
லியோபிலிசேஷன் என்பது ஒரு தீர்வை ஒரு திட நிலைக்கு முடக்குவதை உள்ளடக்குகிறது, பின்னர் நீர் நீராவியை வெற்றிட நிலையின் கீழ் பிரிக்கவும் பிரிக்கவும் அடங்கும். உலர்ந்த கரைப்பான் அதே கலவை மற்றும் செயல்பாட்டுடன் கொள்கலனில் உள்ளது. வழக்கமான திரவ உலைகளுடன் ஒப்பிடும்போது, பி.ஐ.யை லிம் செய்வதன் மூலம் உற்பத்தி செய்யப்படும் முழு-கூறு லியோபிலிஸ் நாவல் கொரோனவைரஸ் நியூக்ளிக் அமில கண்டறிதல் மறுஉருவாக்கம் பின்வரும் பண்புகளைக் கொண்டுள்ளது:
மிகவும் வலுவான வெப்ப நிலைத்தன்மை:இது 60 நாட்களுக்கு 56 at இல் ஸ்டாண்ட் சிகிச்சையுடன் முடியும், மேலும் மறுஉருவாக்கத்தின் உருவமும் செயல்திறனும் மாறாமல் இருக்கும்.
சாதாரண வெப்பநிலை சேமிப்பு மற்றும் போக்குவரத்து:குளிர் சங்கிலி தேவையில்லை, திட்டமிடப்படாத முன் குறைந்த வெப்பநிலையில் சேமிக்க தேவையில்லை, குளிர் சேமிப்பு இடத்தை முழுமையாக விடுவிக்கவும்.
பயன்படுத்த தயாராக:அனைத்து கூறுகளையும் லியோபிலிங் செய்வது, கணினி உள்ளமைவின் தேவையில்லை, நொதி போன்ற அதிக பாகுத்தன்மை கொண்ட கூறுகளின் இழப்பைத் தவிர்க்கிறது.
ஒரு குழாயில் மல்டிபிளக்ஸ் இலக்குகள்:கண்டறிதல் இலக்கு வைரஸ் ஜெனோவேரியேஷனைத் தவிர்ப்பதற்காக நாவல் கொரோனாவிரஸ் ORF1AB மரபணு, N மரபணு, S மரபணு ஆகியவற்றை உள்ளடக்கியது. தவறான எதிர்மறையைக் குறைப்பதற்காக, மனித RNASE P மரபணு உள் கட்டுப்பாட்டாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது, இதனால் மாதிரி தரக் கட்டுப்பாட்டுக்கான மருத்துவ தேவையை பூர்த்தி செய்ய.